气相色谱方法开发的一般步骤

　　1、样品来源及其预处理方法
 

　　GC直接分析的样品必须是气体或液体，固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中，而且要保证样品中不含GC不能分析的组份(如无机盐)或可能会损坏色谱柱的组份。
 

　　这样，我们在接到一个未知样品时，就必须了解它的来源，估计可能含有的组分，以及样品的沸点范围。如能确定直接进样分析，只要找一种合适的溶剂，一般讲，溶剂应具有较低沸点，从而使其容易与样品分离。尽可能避免用水，二氯甲烷和甲醇作溶剂，它们对延长色谱柱的使用寿命不利。如果用毛细管分析，应注意样品浓度不要太高，以免造成柱超载，通常样品的浓度为mg/ml级或更低。
 

　　如果样品中有不能用GC直接分析的组分，或样品浓度太低，就必须进行必要的预处理，包括采用一些预分离手段，如各种萃取技术，浓缩方法，提纯方法等。
 

　　2、确定仪器配置
 

　　所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置，什么载气，什么色谱柱及其什么检测器。
 

　　3、确定安初始操作条件
 

　　初始分离条件，主要包括进样量，进样器温度，检测器温度，色谱柱温度和载气流速度。
 

　　1)进样量要根据样品浓度，色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。
 

　　2)进样口温度主要有样品的沸点范围决定，还要考虑色谱柱的使用温度。首先要保证待测样品全部汽化，其次要保证汽化的样品组分能够全部流出色谱柱，而不会在柱中冷凝。
 

　　3)色谱柱温度的确定主要由样品的复杂程度和汽化温度决定。
 

　　4)检测器温度是指检测器加热块温度而不是实际检测点，如火焰的温度。
 

　　检测器温度设置原则是保证流出色谱柱的组分不会冷凝，同是又满足检测器灵敏度的要求。大部分检测器的灵敏度受温度影响不大，故检测器温度可参照色谱柱的zui高温度设定。
 

　　5)载气流速的确定相对容易一些，开始可按照比*流速(氮气约20cm/S、氦气约25cm/S、氢气约为30cm/S)高10%来设定，然后根据分离情况进行调节，原则是既保证待测物的*分离，又要保证尽可能短的分析时间，用填充柱时载气流速一般设为30ml/min。
 

　　当仪器没有配置电子气路(EPC)控制时，必须通过皂膜流量计或测定时间的方法来测定载气流速，通过调节柱前压的方式来改变载气流速，色谱柱越长，内径越小柱温越高，需要柱前压越高。当所用检测器需要燃烧气和辅助气时，还要设定这些气体的流量。
 

　　4、分离条件优化
 

　　分离条件的优化是一个很大的题目，这里只从实用角度简单介绍优化方法。这里只强调操作条件柱温和载汽流速的优化。条件优化的目的就是在zui短的分析时间内达到符合要求的分离结果。
 

　　5、定性鉴定
 

　　所谓定性，就是确定色谱峰的归属，对于简单样品，可根据准物质对照用保留值来确定色谱图上的峰哪个是要分析的峰。定性时必须注意，在同一色谱柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所以对未知物的定性仅仅用一个保留数据是不够的，双柱或多柱保留数值定性是GC中较为可靠的方法，因为不同化合物在不同色谱柱上具有相同保留值的几率要小的多。
 

　　6、定量分析
 

　　在这一步骤中是要确定用什么定量方法来测定待测组分的含量。